克隆载体应具备的基本特点
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作为克隆载体,应具备如下基本特点(图21-6):①至少有一个复制起点使载体在宿主细胞中进行自主复制,并能使克隆的外源DNA片段得到同步扩增。②至少有一个选择标志(selection marker):选择标志是区分含与不含载体的细胞所必需的,包括抗生素抗性基因、β-半乳糖苷酶基因(lacZ)、营养缺陷耐受基因等。例如pUC18质粒载体含有氨苄青霉素抗性基因(ampR)。③有适宜的RE的单一切点:载体中一般都构建有一段特异性核苷酸序列,在这段序列中包含了多个RE的单一切点,可供外源基因插入时选择,这样的序列称多克隆位点(multiple cloning sites,MCS)。
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