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色谱法是目前分离三萜类化合物最常用的方法，通常采用多种色谱法相组合的方法：

①吸附柱色谱法；②分配柱色谱法；③高效液相色谱法；④大孔树脂柱色谱；⑤凝胶色谱法张博士医考|整理。 张博|士医考整理。

（1）吸附柱色谱法：

①常用方法，可用于分离各类三萜化合物

②依据所用的吸附剂性质的不同，分为正相吸附柱色谱和反相吸附柱色谱张博士|医考整理。 张博士医考|搜集整理。

③正相吸附柱色谱的吸附剂常用硅胶

④反相柱色谱通常以键合相硅胶Rp-18、Rp-8或Rp-2等为填充剂张博士医考|搜集整理。 .

（2）分配柱色谱法：多用于分离皂苷，常用硅胶等作为支持剂，固定相为3%草酸水溶液等，流动相为含水的混合有机溶剂：如氯仿-甲醇-水，正丁醇-水等

（3）高效液相色谱法：是目前分离皂苷类化合物最常用的方法，分离效能较高张博士医|考整理。 .用于皂苷的分离制备一般采用反相色谱柱，以甲醇-水、乙腈-水等系统为洗脱剂

（4）大孔树脂柱色谱：适用于皂苷的精制和初步分离张|博士医考整理。 张博|士医考搜集整理。

操作：将含有皂苷的水溶液通过大孔树脂柱后，先用水洗涤除去糖和其他水溶性杂质，北京张博士医考搜集整理然后再用浓度由低到高的甲醇或乙醇依次进行梯度洗脱，极性大的皂苷可被l0%～30%的醇洗脱下来，极性小的皂苷则被50%以上的醇洗脱下来

（5）凝胶色谱法：分子筛的原理来分离分子量不同的化合物，在用不同浓度的甲醇、乙醇或水等溶剂洗脱时，各成分按分子量递减顺序依次被洗脱下来张博士医考|搜集整理。 张博士医考整 理。即分子量大的皂苷先被洗脱下来，分子量小的皂苷后被洗脱下来 应用较多的是在有机相中使用的SephadexLH-20.

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