免疫组化（LP法）操作步骤是医学检验技士考试所涉及的内容，张博士医考整理如下，供广大医学检验技士考试考生参考学习。

1.切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行

2.缓冲液洗3min/2次。

3.为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在HydrogenPeroxideBlock中孵育10-15分钟。

4.缓冲液洗5min/2次。

5.滴加UltraVBlock，在室温下孵育5分钟以封闭非特异性的背景染色。

（注：孵育不要超过10分钟，否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有5-10%正常羊血清，这一步可以省略。）

6.缓冲液洗5min/2次。

7.滴加一抗工作液37℃孵育1-2小时。（具体孵育时间和温度由试验者最终决定）张博士医考

8.缓冲液洗5min/2次。

9.滴加PrimaryAntibodyEnhancer（增强子），在室温下孵育20分钟。

10.缓冲液洗5min/2次。

11.滴加HRPPolymer（酶标二抗），在室温下孵育30分钟。

（注：HRPPolymer对光敏感，应避免不必要的光暴露并储存在不透明的小瓶中。）

12.缓冲液洗5min/2次。

13.向1mlDABPlusSubstrate中滴加1-2滴DABPlusChromogen，混匀后滴加到切片上，孵育3-15分钟。张博士医考（具体时间由染色深浅决定。）14.自来水充分冲洗，复染，脱水，透明，封片。