1.抗体琼脂板的制备同单向扩散法，但注意稀释液应用pH8.6离子强度0.05M的巴比妥缓冲液。

2.打孔。

3.将用缓冲液稀释的适宜浓度的参考血清及适当稀释的抗原（人血清）分别加入各孔中，每孔10或20微升，要求加量准确而不外溢。

4.把加完样的免疫琼脂板放入电泳槽中进行电泳，电压4～6伏/厘米，电泳时间1～5小时，直到大部分抗原孔前端出现顶端尖窄而完全闭合的火箭状沉淀线北京张博士医考搜|集整理，关闭电源。

5.取下琼脂板，以抗原孔中心为起点，量出各火箭状沉淀线的高。

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