(一)涂片种类及标本采集
采集标本前24小时内禁止性生活、阴道检查、阴道灌洗及用药,取标本的用具必须无菌干燥。
1.阴道涂片主要目的是了解卵巢或胎盘功能。对已婚妇女,一般在阴道侧壁上1/3处轻轻刮取黏液及细胞作涂片,避免将深层细胞混入而影响诊断,薄而均匀地涂于玻片上,置95%乙醇中固定。对无性生活的妇女,阴道分泌物极少,可将消毒棉签先浸湿,然后伸入阴道在其侧壁上1/3处轻卷后取出棉签,在玻片上涂片并固定。
2.宫颈刮片是筛查早期子宫颈癌的重要方法。取材应在宫颈外口鳞–柱状上皮交接处,以宫颈外口为圆心,将木质铲形小刮板轻轻刮取一周,避免损伤组织引起出血而影响检查结果。若白带过多,应先用无菌干棉球轻轻擦净黏液,再刮取标本,然后均匀地涂布于玻片上。该法获取细胞数目较少,制片也较粗劣,故多推荐涂片法。
3.宫颈管涂片先将宫颈表面分泌物拭净,用小型刮板进入宫颈管内,轻轻刮取一周作涂片。但最好使用”细胞刷”(cytobrush)刮取宫颈管上皮。将“细胞刷”置于宫颈管内,达宫颈外口上方10mm左右,在宫颈管内旋转360°后取出,旋转“细胞刷”将附着于小刷子上的标本均匀地涂布于玻片上或立即固定或洗脱于保存液中。小刷子的摩擦力可使上皮细胞脱落,取材效果优于棉拭子。涂片液基细胞学(liquid-based cytology)特别是用薄层液基细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)所制备单层细胞涂片效果清晰,阅片容易,与常规制片方法比较,改善了样本收集率并使细胞均匀分布在玻片上。此外,该技术一次取样可多次重复制片并可供作高危型HPV DNA检测和自动阅片。
4.宫腔吸片疑宫腔内有恶性病变时,可采用宫腔吸片,较阴道涂片及诊刮阳性率高。选择直径1~5mm不同型号塑料管,一端连于干燥消毒的注射器,用大镊子将塑料管另一端送入子宫腔内达宫底部,上下左右转动方向,轻轻抽吸注射器,将吸出物涂片、固定、染色。取出吸管时停止抽吸,以免将宫颈管内容物吸入。宫腔吸片标本中可能含有输卵管、卵巢或盆腹腔上皮细胞成分。亦可用宫腔灌洗法,用注射器将10ml无菌0.9%氯化钠注射液注入宫腔,轻轻抽吸洗涤内膜面,然后收集洗涤液,离心后取沉渣涂片。此法简单,取材效果好,特别适合于绝经后出血妇女,与诊刮效果相比,患者痛苦小,易于接受,但取材不够全面。
(二)染色方法
细胞学染色方法有多种,如巴氏染色法(papanicolaou stain)、邵氏染色法及其他改良染色法。常用的为巴氏染色法,该法既可用于检查雌激素水平,也可用于筛查癌细胞。
(三)辅助诊断技术
可采用免疫细胞化学、原位杂交技术、影像分析、流式细胞仪测量及自动筛选或人工智能系统协助诊断。
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