张博士医考2013年公共卫生之血清流行病学研究方法应注意的问题？

（1）选择调查方法：血清流行病学调查，不仅要掌握流行病学理论，而且还应具备一定的血清学和血液化学等方面的知识，使两者密切地结合起来。血清流行病学调查方法取决于调查的目的和要求。调查人群某一时间内相对稳定的免疫水平时，应用横断面调查法，调查人群中免疫水平动态变化的特点时，应用重复横断面调查方法；调查某种疾病或疫苗的抗体在同一人群中长期的变化特点时，应用纵向调查方法。

（2）调查对象：因调查目的不同而异，但都应按照随机抽样的原则选择调查对象，并尽可能了解提供血清标本的人群特点。每项专题调查的对象，应提出具体要求。如调查某种传染病的隐性感染率，应选择既往无该病历史，目前亦无该病特异性症状、体征的健康者，同时自观察日起，于该病最长潜伏期内发病者，亦应除外。调查感染后免疫持续时间，应选择显性感染病人作纵向观察、评价预防接种免疫学效果时，应选择对该病易感而在一定时间内无预防接种史或服过其他预防药物的人，并应证明血清抗体阴性或效价较低者。调查动物病或自然疫源性疾病时，应根据疾病的种类，选择当地优势种属，并应考虑动物的生态习性与人类生产活动、生活活动密切有关的因素等。

（3）估计血清样本数量：要根据血清抗体的可能检出率、检测方法的准确性及调查方法所要求的特异性及敏感性而定。

（4）血清标本的采集、运输及贮存：血液标本可自静脉采集，亦可自耳垂、指端或足跟（限婴儿）采集。采血量根据检测项目、实验方法而定，但以微量血多项目检测最为理想。血清标本不应放置过久，以免血清成分发生破坏，一般应限制在10～20小时以内。血清标本长途运送时，可保存在塑料毛细管内，或将血清滴在滤纸片上干燥后保存。干燥血清可能失去补体活性，检验时应加补体。血清标本如需长期保存，应存于低温冰箱或冷冻干燥处理，以防变质。

（5）选择检测方法：根据疾病的种类及免疫反应的特点，选用不同的血清学方法。如细菌性疾病，通常检测凝集素抗体；病毒性疾病，通常检测血凝抑制抗体或中和抗体。血清学检测方法要求简易、敏感、特异、经济和安全。

（6）细胞免疫及皮肤试验方法的应用：病原体感染机体后引起的免疫反应，包括体液兔疫和细胞免疫两个方面，并分别产生抗体和淋巴因子，二者都可以反映机体感染和免疫状况。病原体种类不同，机体发生免疫反应的类型也不相同。血清学反应主要是检测机体体液免疫，并不能反映细胞免疫反应的状况。随着免疫学的发展及疾病防治工作的需要，细胞免疫的检测亦逐渐应用于血清流行病学调查。细胞免疫功能的检测方法，有体外法（淋巴细胞计数、E玫瑰花试验、淋巴细胞转化试验、巨噬细胞移动抑制试验等）及体内法如皮肤试验（Ⅳ型超敏反应）等。皮肤试验包括皮上划痕、皮内注射及斑贴法等，操作简便，不需特殊设备，适合于流行病学调查。如通过牛痘接种观察人群对天花的免疫状况，布鲁菌菌素及结核菌素试验观察人群对布鲁菌病及结核病的免疫状况等。皮肤试验还可以配合血清学抗体检测，考核疫苗免疫学效果及筛选某些疫苗接种对象。此外，也可以选用植物血凝素（PHA）、二硝基氯苯（DNCB）等物质作皮肤试验，以测定机体非特异性细胞免疫功能。

（7）收集临床、卫生及流行病学资料：血清流行病学调查，不要单纯地进行血清学调查，必须结合每种疾病的临床及流行病学特点收集必要的资料，综合分析，方能获得正确的结论。如既往病史、预防接种及药物预防史、接触史、临床类型、治疗用药情况、卫生状况、人口资料及一般流行病学资料等。

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