指的是与某些绝对的物理量有关系，如质量。它们被用于检测物质来提供与分析物真值最接近的值。向血清样本中加入已知量同位素标记的分析物被再用质谱法测定称为同位素稀释质谱法，这是用于决定性方法的常见技术。已校准的质量分光光度计允许确定未标记分析物的量和已标记分析物的量的比值。这些量的比值可计算出未知的量。美国国家标准和技术研究院（NIST）已正在开发决定性方法，并且此项计划持续了几年。有些专业小组已与美国国家标准和技术研究院合作开发新的决定性方法，来生产标准参考物质（SRM）使得具有已知分析值的样本的广为应用成为可能。

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