北京张博士医考检验资格考试辅导之——血液培养操作规程

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1检验目的做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。

2原理使用BACT-IST黑马微生物鉴定系统，原理见鉴定系统操作规程。

3标本要求（1）标本类型：血液（2）标本采集：给患者用抗生素前抽取。见标本采集手册（3）标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。

（4）标本拒收状态：非无菌方式采集的标本。

4容器和添加剂类型使用灭菌器皿或鉴定仪配备的血培养瓶盛放标本，不加任何防腐剂，抗凝剂。

5试剂（1）试剂名称：革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、麦康凯平板、相关生化试剂等（2）试剂生产厂家：珠海贝索生物技术有限公司（3）包装规格：4X250Ml（4）试剂盒组成：试剂1：龙胆紫液试剂2：碘溶液试剂3：脱色液试剂4：沙黄溶液6仪器设备：（1）接种针、接种环、酒精灯、（2）BACT-IST黑马微生物鉴定系统（3）显微镜、GNP-P270隔水式恒温培养箱、SW-CJ-IF超净工作台、MCO-15A三洋牌二氧化碳培养箱、0414-1台式离心机、FA1004电子天平7校准程序（送XX市计量质量检测研究所校准）

8操作步骤（1）细菌的分离培养：血培养瓶经12-18小时35℃孵育后，肉眼若见生长则转种血平板及麦康凯琼脂培养基，35℃培养过夜，观察结果。菌落生长者挑取优势菌菌落做纯培养。（若初次分离菌落单一且生长较多时可直接做鉴定）

（2）涂片：取菌落涂片做革兰氏染色，确认时G+或G-以及是球菌还是杆菌（球杆菌）。

（3）细菌鉴定及药敏实验：革兰氏阴性杆菌做氧化酶试验（必要时做动力试验），氧化酶试验阳性或氧化酶试验阴性但不利用葡萄糖不产酸者使用非发酵鉴定测试板；氧化酶试验阴性者则使用肠杆菌科细菌测试板；革兰氏阳性球菌（主要是成簇或四联排列），触酶试验阳性者接种葡萄球菌、微球菌鉴定/药敏测试板；触酶试验阴性者则接种链球菌鉴定/药敏测试板。

（4）鉴定：按照鉴定仪要求调配菌液浓度，见BACT-IST黑马微生物鉴定系统、PHOENX100全自动细菌鉴定药敏分析系统操作规程。

9质量控制：参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动10生物参考区间正常人体血液无菌。

11患者检验结果的可报告区间细菌鉴定到种或属，同时报告药物敏感试验结果。

12临床意义：为医生提供感染的病原学诊断。

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