1.辅助因子：在酶活性测定时，要保证辅基或辅酶的供给。

2.激活剂：在酶活性测定时，要满足酶对激活剂或表面活性剂的需要。如Cl-是淀粉酶的激活剂，N-乙酰半胱氨酸时是CK检测的激活剂。

3.抑制剂：使酶活性降低，在测定酶活性时，应避免抑制剂的影响。

使酶活性降低或丧失的物质称为抑制剂。抑制分为竞争性抑制和非竞争性抑制，在酶活性测定过程中，应尽量避免抑制剂存在。但在有的反应体系中，加入竞争性抑制剂可以提高工具酶的米氏常数。

为了减少上述诸多因素对酶催化活性浓度的影响，国际临床化学学会(IFCC)推荐采用具有量值溯源的，互换性好的标准物质用于血清酶催化活性浓度的测定的校正。目前，IFCC已经公布了包括ALT，AST，ALP，GGT，CK，LDH，Amylase在内的数个常用酶测定的参考方法，该参考方法主要应用于酶学测定参考实验室，对厂家的试剂进行溯源性考核。

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