血清总蛋白测定一般采用双缩脲比色法，它是目前首先推荐的蛋白质定量方法。此法的原理是蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与二价铜离子（Cu2+）作用生成蓝紫色的化合物，这种颜色反应强度在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比，经与同样处理的蛋白标准液比较，即可求得蛋白质含量。此反应的优点是清、球蛋的反应性相近，操作简单，重复性好，干扰物质少，为首选的常规方法，其缺点是灵敏度较低。

分光光度计试剂：

1.6mol／L NaOH溶液称取NaOH2409.溶于新鲜制备的蒸馏水约800ml中，定容至lL，贮于有盖塑料瓶中。

2.双缩脲试剂称取硫酸铜结晶（CuS04?5H，O）39溶干新鲜制备的蒸馏水500ml中，加入酒石酸钾钠（NaKC4H406?4H，O，用以结合Cu2+，防止CuO在碱性条件下沉淀）99和KI（防止碱性酒石酸铜自动还原并防止Cu20的离析）Sg.待完全溶解后，在搅拌下加入6mol／L NaOH溶液100ml，并用蒸馏水定容至1L，置塑料瓶中盖紧保存。此试剂室温下可稳定半年北京张博士医考整理，若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。

3.60—709／L蛋白质标准液可用定值参考血清或标准白蛋白作标准。

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