1.血液标本的采集

血液标本的采集，可分为毛细血管采血法和静脉采血法。DETA-K2抗凝剂对血细胞形态影响很小，因此适用于血细胞计数，特别是血小板计数。血细胞分析仪使用标本一般要求为静脉抗凝血，为了避免淤血和浓缩，压脉带压迫时间不可过长，最好不超过半分钟。因为毛细血管标本，受末梢血循环状态、采血技术的影响，有时血液易形成小凝块，堵塞机器造成实验结果偏差。

2.血细胞分析仪计数

血液标本在室温中必须6h内上机检测，上机前一定要将血液标本颠倒混匀至少8次，如需制备血涂片，应在采血后3h内涂制。无论多先进的血液分析仪，只能当作一种过筛手段，不能完全替代目视法显微镜镜检，因为仪器还不能准确区分幼稚细胞、异常淋巴细胞、有核红细胞等。因此，当出现白细胞、红细胞及血小板明显升高或降低，白细胞分类出现异常结果，白细胞、张博士医考搜集整理红细胞及血小板直方图或散点图出现异常，均应用显微镜涂片复查。

3.血涂片的制备

血涂片既可由非抗凝的静脉血和毛细血管血制备，也可由DETA-K2抗凝血制备，EDTA-K2抗凝血中，钙离子被螯合后，能阻止血小板聚集，推片时血小板均匀平均，显微镜下易于对血小板进行观察评价，但有时可观察到因EDTA-K2引起的红细胞皱缩及白细胞丛集现象，因此最好使用非抗凝血制备涂片，这样可减少因抗凝剂所致的人工假象。涂片的好坏与血滴 、推片与载片之间角度有关；血膜分布不均，主要是推片边缘不齐，用力不均或载玻片不清洁所致，将制成的血膜在空气中挥动，使迅速干燥，以免血细胞皱缩。

4.血涂片的染色

瑞氏-姬姆萨混合染色，两种染色法各有其优缺点，故在细胞学检查中常将两者结合起来，取长补短，细胞的胞质、颗粒、核等染色均较满意；染色环境的pH对着色影响很大，应维持在pH值6.4～6.8，因此必须使用缓冲液；未干透血膜不能立即染色，否则染色时易脱落。

5.血涂片的镜检

选择血涂片的体尾交界处染色良好的部分，在油镜下按一定方式有规律地移动视野，一般计数100个～200个白细胞，同时注意白细胞、红细胞、血小板形态的改变和分布，有无血液寄生虫、有核红细胞、幼稚或原始细胞、异淋细胞等。

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