糖化血红蛋白测定中的常用检测方法是医学检验主管技师考试可能涉及到的知识点，张博士医考小编整理了相关知识点，供考生参考。

离子交换色谱法（HPLC、LPLC）：基于电荷差异进行分析。葡萄糖与血红蛋白（Hb）的β链N末端缬氨酸（Val）结合降低了等电点，导致糖化Hb带的正电荷比未糖化Hb的少，与树脂的附着力小，可以分别用不同的离子浓度的缓冲液在不同的时间将Hb从阳离子交换柱中洗脱下来，再根据每个峰值下的面积来计算HbA1c占总Hb的比例。

精密度高，有些产品CV可以小于1%

非特异性问题存在，有些产品仍会受变异Hb 、氨基甲酰化和乙酰化Hb影响

可采用高通量的高效液相色谱（HPLC）和低压系统（LPLC）方法

美国糖化血红蛋白标准化计划（NGSP）的参考方法

电泳法（Elec）：研制于上世纪80年代，与离子交换层析法一样也是基于糖化和非糖化Hb所带的电荷不同进行分离。该方法操作简易，不受温度、pH影响，在当时相对其他方法来说精密度较高，但是需成批样本分析，分析时间较长，临床上现已较少使用。

亲和色谱法（HPLC-af chr）：基于结构不同进行分析。利用对m-氨苯基硼酸依赖的糖化血红蛋白1，2-顺式二醇基团和固定的硼酸阴离子的特殊反应而设计的。与Hbα和β链的缬氨酸（Val）和赖氨酸（？-Lys）连接的葡萄糖均会与硼酸结合形成可逆的复合物，未糖化Hb先被洗脱后，再用山梨醇分离复合物，并将全部糖化Hb洗脱出来。

检测结果是“总”糖化Hb，通过校准其结果与HPLC有良好的相关性

不受温度、尿毒症、HbF或Schiff base的干扰

室内精密度较高，实验室间的结果存在差异

免疫法（Im tur）：抗原抗体反应原理。单克隆抗体技术的运用使该方法有了快速发展，最早是英国Dako公司研制出识别葡萄糖附着在Hb的β链N末端8个氨基酸抗原位点的单克隆抗体，用酶免疫原理（EIA）进行检测。

具有较好的精密度、与其他方法有较好的相关性

可以在自动生化仪上用比浊法进行定量测定

抗原与IFCC一级参考物质β链N末端6个氨基酸肽端相似

如果用6个氨基酸的为抗原，当Hb发生第6位氨基酸变异[HbS（β6glu→val）和HbC（β6glu→lys）]时将不会被识别，可导致厂家间的检测结果存在着偏倚

各厂家产品的单抗针对的抗原决定簇不同、亲和力不同等因素也会影响结果的可比性

酶法（En）：近几年才推出在自动生化仪上测定的生化反应方法。其原理是在蛋白酶的作用下，切断HbA1c的？链N末端的糖化二肽，糖化二肽在果糖基肽氧化酶的作用下生成过氧化氢，在过氧化物酶的存在下与显色剂产生显色反应，通过测定吸光度求出HbA1c的百分浓度。该方法精密度好，同HPLC和免疫法均有较好的相关性。

快速检验（POCT：Mic chr、Flu im）