（1）培养基的使用，应注意下列各点：

1）尽量使用新鲜培养基，2～4h内用完；

2）应使用预还原培养基，预还原24～48h更好；

3）可采用预还原灭菌法制作的培养基（用前于培养基中加入还原剂，如L-半胱氨酸、硫乙醇酸钠、维生素C及葡萄糖等，尽可能使预还原剂处于还原状态）；

4）液体培养基应煮沸10min，以驱除溶解氧，并迅速冷却，立即接种；

5）培养厌氧菌的培养基均应营养丰富，并加有还原剂与生长刺激因子（血清、维生素K、氯化血红素、聚山梨酯-80等）。

（2）培养基的选择：初次培养一般都使用选择培养基和非选择培养基。

1）非选择培养基：本培养基使分离的厌氧菌不被抑制，几乎能培养出所有的厌氧菌。常使用心脑浸液琼脂（BHI）、布氏琼脂（BR）、胰豆胨肝粉琼脂（GAM）、胰胨酵母琼脂（EG）、CDC厌氧血琼脂等。

2）选择培养基：为有目的选择常见厌氧菌株，以便尽快确定厌氧的种类。