紫外—可见分光光度法
紫外—可见分光光度法(一)特点灵敏度高,可达10-4g/ml~10-7g/ml;准确度高,相对误差为2%~5%;仪器价格较低廉,操作简单,易于普及;应用广泛,许多化合物可以,同时应用计算分光光度法不经分离而直接测定混合物中各组分的含量。
(二)基本原理波长200~400nm范围称为紫外光区,400~760nm称为可见光区。物质吸收紫外和可见光区电磁波而产生的吸收光谱称为紫外-可见吸收光谱。
Lambert-Beer定律 A=ECL A为吸收度,E为吸收系数,C为被测物质溶液浓度,L为光路长度。吸收系数E是物质的物理常数,随浓度C单位的不同有不同表示方法。药品检验中使用百分吸收系数 ,物理意义是当吸光物质溶液浓度为1%(1g/100ml),液层厚度为1cm时的吸收度。
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